تهيه نمونه‌هاي استاندارد از گونه‌ موردنظر با غلظتهاي مشخص<br>C1, C2, C3, C4,  …<br>3ـ قرائت جذب محلولهاي استاندارد<br>As1, As2, As3, As4, … <br>4ـ رسم جذب برحسب غلظتهاي استاندارد و بدست آوردن نمودار كاليبراسيون <br>5ـ اندازه‌گيري جذب محلول مجهول و بدست آوردن غلظت  مجهول از روي نمودار كاليبراسيون  <br>            Cx  Ax  <br><br>- در عمل ابتدا محلول بلانك در سل قرار داده شده شكاف منبع تابش بسته شده 100% جذب يا صفر درصد عبور تنظيم مي‌شود<br> - سپس شكاف منبع تابش باز شده 100% عبور يا صفر درصد جذب تنظيم مي‌شود <br>- بعد از تنظيم صفر و 100جذب محلولهاي استاندارد و مجهول اندازه‌گيري مي‌شود.<br><br>اين عمل در دستگاهها توسط Auto zero يا Baseline مي‌گردد.<br>عوامل انحراف از قانون Beer-Lambert   (A = bC)<br>1ـ انحرافهاي شيميايي <br>تفكيك، پليمري شدن, تجمع، تشكيل كمپلكسهاي مختلف، حلال‌پوشي ترکيبات مورد اندازه گيري، تغييرpH محيط و...<br>2ـ انحرافهاي فيزيكي<br>تغيير رنگ برخي از مواد متناسب با تغيير غلظت، تفاوت ضريب شکست (n) در محلولهاي رقيق و غليظ<br>3ـ انحرافهاي دستگاهي<br> تكفام نبودن تابش، آلودگي سلها، خطي نبودن جريان حاصل در دتکتور(فتوسل) با شدت نورتابشي، تغيير در مقدار الكتريسيته و درجه حرارت.<br>شماي دستگاه اسپكتروفتومتر<br>1- منبع تابش: نور سفيد Io<br>2- محل نمونه: نمونۀ‌ گازي، جامد، مايع <br>3- تجزيه‌گر: منشور، يا شبكه <br>4- آشكارساز: PMT  <br>5- ثبات: Chart<br>قسمتهاي مختلف دستگاه اسپكتروفتومتر<br>1- منابع تابش معمولي در اسپكتروفتومتري  <br>- لامپ تنگستن براي ناحيه مرئي  340-1000nm    (Visible)<br>- لامپ دتريوم براي ناحيه ماورا بنفش (Uv)   190-370nm<br>2- منوكروماتور<br>....نام فایل : تجزيه نمونه آلودگيها

فرمت : .ppt

تعداد صفحه/اسلاید : 44

حجم : 3 مگابایت

تجزيه نمونه آلودگيها
1- انواع اسپکتروفوتومتری را بیان کند.
2- قانون بیرلامبرت را توضیح دهد.
3- اجزاء دستگاه اسپکتروفوتومتر را بیان کند.
4- انواع منبع نور را در اسپکتروفوتومتر نور مرئی- ماوراء بنفش بیان کند.
5- دو نوع cell یا کووت را توضیح دهد.
6- نحوۀ تهیۀ منحنی کالیبراسیون را شرح دهد.
7- روش تهیۀ منحنی کالیبراسیون بطریق Standard addition را بیان کند.
What is Spectroscopy?
The study of molecular structure and dynamics through the absorption, emission and scattering of light.
اسپكتروفتومتر يا طيف سنج يك دستگاه آزمايشگاهي اوليه است كه جهت خواندن نتايج آزمايش هاي كه واكنش آنها از نوع End point هستند بكارمي رود اين دستگاه ميزان جذب يا عبور طول موجهاي مشخصي از انرژي تابشي (نور) از يك محلول را اندازه گيري مينمايد بيشترين كاربرد آن در آزمايشگاه در بخش بيوشيمي است.
اساس كار اسپكتروفتومتر همانند بسيار از دستگاههاي آزمايشگاهي، براندازه گيري ميزان نور جذب شده توسط يك محلول رنگي است كي طبق قانون بير-لامبرت (-Lambert Bear) ميزان جذب نور(OD) متناسب با غلظت ماده حل شده در محلول است.
قانون بير-لامبرت زماني صادق است كه:
1- نور منتشر شده بر روي ماده مورد نظر تك رنگ باشد
2-غلظت ماده حل شده بايد در محدوده خطي باشد
اسپكتروفتومتر (Spectrophotometer)

The Electromagnetic Spectrum
n = c / l
E = hn

Spectroscopy
Spectral Distribution of Radiant Energy
 
Wave Number (cycles/cm)
قانون بير لامبرت: Beer-Lambert or Bouguer-Beer
شدت نور (اشعه الكترومغناطيسي) جذب شده متناسب با غلظت ماده و طول سل (مسيري كه نور مي پيمايد) دارد.

(%T)T: عبور(درصد عبور)
: ضريب جذبي مولي L. mol-1 cm-1
b: ضخامت سل (طول مسير عبور اشعه الكترو مغناطيس) cm
C: غلظت mol.L-1
جذب تابش
هر چقدر ضريب جذب مولي ماده بيشتر باشد روش حساس‌تر است (يعني به ازاء b, c ثابت داراي A بيشتري است)
ـ ماده‌اي كه هيچ گونه جذب ندارد (يا محلولي كه در آن هيچ ماده جذب كننده‌ تابش وجود ندارد و هيچ كاهشي در شدت تابش ايجاد نمي کند) محلول بلانك يا سفيد ناميده مي شود.
در اين مورد مقدار جذب صفر و يا عبور (T) و درصد عبور (%T) صددرصد است.
طرز تعيين غلظت يك ماده توسط اسپكتروفتومتري
1ـ تهيه محلول بلانك (يا محلولي كه داراي تمامي گونه‌ها بغير از گونه مورد نظراست) A=0